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Fijación rápida in vivo y aislamiento de complejos traslacionales de células eucariotas
 
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Fijación rápida in vivo y aislamiento de complejos traslacionales de células eucariotas

Article DOI: 10.3791/62639-v 14:29 min December 25th, 2021
December 25th, 2021

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Presentamos una técnica para estabilizar rápidamente complejos traslacionales (biosíntesis de proteínas) con reticulación de formaldehído en levaduras vivas y células de mamíferos. El enfoque permite diseccionar intermedios transitorios e interacciones dinámicas ARN:proteína. Los complejos reticulados se pueden utilizar en múltiples aplicaciones posteriores, como en métodos de perfiles basados en secuenciación profunda, microscopía y espectrometría de masas.

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Biología Número 178 captura instantánea de biosíntesis de proteínas estabilización del complejo de traducción respuestas celulares rápidas estrés celular complejos ribosómicos purificación de afinidad de intermedios de traducción control traslacional secuenciación de perfiles complejos de traducción TCP-seq perfilado de ribosoma (traducción) ribo-seq sedimentación de ribosomas por ultracentrifugación en gradiente de sacarosa
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